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机能实验设计大纲


机能实验学 探索性实验设计大纲
姓名: 姓名: 学号: 专业年级: 成绩: 学号: 专业年级: 成绩: 研究课题名称: 研究课题名称: 探究姜糖水对缓解痛经的疗效及其可能存在的机制 探究

2007.7

(一) 选题目地、意义: 选题目地、意义: 民间有姜糖水能缓解痛经的说法,本实验主要探究姜糖水对痛经是否有缓解作用,以及姜糖水缓 解痛经的作用是否与降低 PGF2a 有关。 原发性痛经是女性常见的多发痛证之一,痛经一直是生育期女性常见的困扰,据报道我国女性痛 经的患病率为 33.15%,因此寻找可靠的药物提供更加有效而更少副作用的止痛方法,以此来减缓女性 的困扰十分必要,而姜糖水在老百姓日常生活中很常见,且方便制取,故研究姜糖水是否有助于缓解 痛经有重要意义 。 (二) 实验动物:ICR 小鼠 二 实验动物: 50 只 性别: 性别: 雌性 体重: 体重: (20±2)g 年龄: 年龄: 6~8 周龄 数量: 数量:

(三) 所需特殊器材、试剂的种类与数量: 所需特殊器材、试剂的种类与数量: 特殊器材 的种类与数量 1、器材:注射器、小鼠灌胃针、秒表、小鼠前列腺素 F2α(PGF2α)ELISA 试剂盒、天平、离心 机 2、药物:缩宫素注射液、己烯雌酚注射液、生理盐水、红糖、金丝枣和姜 (五) 主要观察指标 (1)观察小鼠扭体反应的潜伏期和扭体次数。 (2)检测小鼠子宫上清液中 PGF2α的浓度。 主要实验方法与步骤: (六) 主要实验方法与步骤: 将 每组 10 只。 随机编号为 1~10 1、 50 只 6~8 周龄的昆明种雌性小鼠。 50 只小鼠随机分成 5 组, 取 号。第一组为阴性对照组 A;第二组为模型对照组 B;第三,四,五组分别为姜糖水低剂量组 C,中剂量组 D,高剂量组 E。 2、姜糖水制备: 将红糖、无核金丝枣和姜片放入炖煮的容器中,注入适量清水,盖上盖子,炖煮半个小 时。将制得的姜糖水分三等份,再将其稀释,获得浓度比为 1:2:4 的低中高三个剂量组。 3、模型的制备: 第一组阴性对照组连续 12d 注射相应的生理盐水。第二、三、四、五组连续皮下注射己烯雌酚 12 d(人工促使动物出于相应的动情期,并提高子宫平滑肌对药物缩宫素的敏感性) 其中第 。 1d、第 12d 为 0. 2 mg / 只,其余每天注射 0. 1 mg / 只。第三、四、五组在注射己烯雌酚的第 5d 开始,连续灌胃给不同浓度的姜糖水 7d。第一二组则注射等剂量的生理盐水。 末次在给己 烯雌酚与姜糖水 1h 后,所有组腹腔注射缩宫素 20IU/kg。 4、分别观察并记录下 1~5 组小鼠的扭体潜伏期(即注射缩宫素后首次出现扭体的时间)和 30min 内扭体的次数(扭体反应:大鼠腹部收缩内凹,躯干与后肢伸展,臂部与侧肢体内旋,为子宫 收缩即痛经的指标) 。 5、在注射缩宫素 30min 后五组中分别随机抽取 5 只小鼠取子宫上清液(子宫上清液标本:切割标 本后,称取重量。加入一定量的 PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持 2-8℃的温度。 加入一定量的 PBS(PH7.4), 将标本匀浆充分。 离心 20 分钟左右(2000-3000 转/分)。 仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用) ,通过小鼠前列腺素 F2α(PGF2α)ELISA 试剂盒检测各组抽检小鼠子宫上清液 PGF2α的浓度。

6、统计学处理 计量数据采用均值±标准差( X ±S)表示。潜伏期的计时单位为秒(s),扭体次数的计算单位为 次,PGF2α的浓度为(pg/ml)。使用 t 检验进行差异的显著性分析,P<0.05 表示实验数据具有统 计学意义。

表 1 姜糖水对缩宫素所致的小鼠痛经模型扭体反应的影响( X ±S) 组别 阴性对照组 模型对照组 姜糖水低剂量组 姜糖水中剂量组 姜糖水高剂量组 n 剂量 mL 潜伏期/s 30min 内扭体次数

表 2 姜糖水对小鼠子宫上清液中 PGF2α含量的影响( X ±S) 组别 阴性对照组 模型对照组 姜糖水低剂量组 姜糖水中剂量组 姜糖水高剂量组 n 剂量 mL PGF2α浓度(pg/ml)

预测结果: (1)若给予姜糖水的实验组扭体反应的潜伏期延长,扭体反应次数减少,且数据具有统计学 意义,则说明姜糖水对痛经的缓解有效,否则无效。 (2)PGF2α是各类痛经的主要原因,而子宫血管痉挛,子宫平滑肌收缩,微循环功能障碍是 PGF2α升高的结果。若给予了姜糖水的实验组 PGF2α的量比对照组的小,且数据具有 统计学意义,则提示姜糖水缓解痛经的作用机制和减少 PGF2α的量有关 ,否则无关。

(七)教师评价: 教师评价: 评价 创新性 合理性 可行性

强 合理 可行

一般 较合理 基本可行

无 不合理 不可行


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