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保旦凤附件1:大理大学大学生科研基金项目申请书2015


项 目 编号

大理大学大学生科研基金 项 目 申 请 书

项目名称 申 请 者 指导教师 所属学院 联系电话 完成时间

分离纯化水生真菌最佳条件的初步探索 保旦凤 朱 丹 农学与生物科学学院 18313006427 2016 年 5 月

大理大学科技处 2015 年制

填 表 说 明
一、申请书请用 A3 纸双面复印,中缝装订,第二项和第三项可自行 加页。封面上“申请者”只能填写一人。 二、部分栏目填写要求: 项目名称 —— 应确切反映研究内容,不得超过 25 个汉字。 项目类别 —— 填写“自然科学研究”或“人文社会科学研究” 。 开始时间 —— 填“2015 年 6 月” 。 完成时间 —— 必须于 2016 年 5 月 31 日以前完成。 课题组成员 —— 对课题研究起主要作用的人员,包含申请者,最 少四名,最多六名。 三、项目申请书经校属学院签署具体意见、加盖公章、院长签字后, 一式二份由各学院统一报送科技处办公室,不接受学生个人报送的材料。

一、基本情况 申 请 人 基本情况 项目名称 申请经费 开始时间 姓名 课 题 组 成 员 签 字 保旦凤 施雪娥 黎静 李婷 性别 女 女 女 女 姓名 保旦凤 性别 女 学号 2013112138 所属学院、专业、入学年份 农生学院、生物科学专业、2013 年 项目类别 自然科学 研究

分离纯化水生真菌最佳条件的初步探索 2000 元
2015 年 6 月

注: 项目经费不得列支指导教师酬金、 餐费及人 员费。

完成时间 所属学院 农生学院 农生学院 农生学院 农生学院

2016 年 5 月

学号
2013112138 2013112144 2013112119 2013112115

所属专业
生物科学 生物科学 生物科学 生物科学

本人签名

项目研究内容概述(概述目的、意义、主要研究内容,500 个字以内) 。 为了弄清分离纯化水生真菌的最佳条件,提高分离纯化水生真菌的概率,保证水 生真菌的萌发率以及培养出更多的菌株, 拟对分离纯化水生真菌的最佳条件进行初步 研究。 水生真菌是湖泊食物网的重要组成部分, 对淡水生态系统的物质循环和能量流动 起着重要作用。 它们主要参与有机物的分解并把有机物矿化成能被植物用来进行初级 生产的无机化合物,但由于它们体积微小等原因,在自然生态系统中还很少被了解。 水生真菌的研究中,分离纯化水生真菌的技术和方法是能否得到菌株的关键所 在,改进实验室手段和方法,不断探索新的分离技术,找到分离纯化水生真菌的最佳 条件,才能得到一些过去在实验室内难以培养的菌株来。而目前很少有人对分离纯化 水生真菌的最佳条件进行研究过。 为此,本项目拟对分离纯化水生真菌的最佳条件进行初步研究。

二、立项依据及项目的创新点 立项依据 水生真菌(aquatic fungi,water molds)是指生长在淡水和海水中的真菌。生活 在水体中并能完成生活史的真菌。广义的水生真菌包括淡水真菌、海洋真菌和咸水 真菌;狭义的水生真菌仅指淡水真菌。水生真菌多样性非常丰富,包括子囊菌门、 担子菌门、接合菌门等几乎所有真菌门类的种类[1]。 水生真菌是水生态系统中极为重要的一个生态类群,是重要的分解者,同时也 为水体中的多种动物提供食物,是食物链中的重要一环。水生真菌能产生多种代谢 物,具有重要的研究意义和广泛的应用前景[2]。 真菌在自然界分布广泛,种类丰富、繁殖速度快,与人类关系密切。无论是农 业、工业、医学、和科学研究中都具有重要作用。此外在农业生产中绝大多数植物 病毒与真菌有关,有些真菌可引起人和动物的疾病[3]。 我国对水生菌物的研究始于 20 世纪初,前期以外国学者为主导,发展到后来特 别是解放以后,则以我国本土学者为主导,经过一个多世纪的研究,截止 2011 年我 国已经正式报道了水生真菌近千种, 其中多数为淡水真菌, 占世界已知水生菌物 3000 种(Shearer et at.2007)的约三分之一[4]。 淡水真菌在生态系统中起着重要作用,它们能分解水中有机质,真菌生长产生 的菌丝则可以成为水体中动物的食物而进入生态系统的食物链。淡水真菌作为一个 几乎尚未开发的自然资源宝库,蕴藏着巨大的潜力,特别是淡水真菌因其代谢途径 复杂、代谢产物种类繁多而日益受到研究者重视[5]。淡水真菌的分类系统还不够完 善,长期以来主要依据形态特征进行分类,分子系统学研究涉及的种类还比较少。 需要更多的分子系统学结合形态学研究使其更趋于自然分类系统[6]。 分离纯化水生真菌是得到纯培养物的关键所在,也是分子系统学研究的基础,而 目前对于分离纯化水生真菌最佳条件的研究较少[7]。本实验拟从以下几个方面探究 分离纯化水生真菌的最佳条件:1 采样后的最佳观察时间 2 单孢分离的最适方法 3 5 探索最适宜水生真菌生长的培养基。 如何减少污染 4 如何提高单孢分离的萌发率, 基础条件:指导教师在水生真菌方面也有研究,并有国家科研基金支持,目前的研 究方向主要是水生真菌,并在此方面有一定的经验,在她的指导下,我们对分离纯 化水生真菌最佳条件的探索也有了明确的方向。我们的组员对水生真菌相关知识有 一定的了解,并且有着丰富的实践经验,目前也参与水生真菌的研究,熟悉实验室 操作,能吃苦耐劳,善于思考。此外,实验室设备齐全,能够提供各种相关仪器设 备进行科学研究。 项目的创新点 对水生真菌的研究中,并没有对分离纯化水生真菌的最佳条件进行研究过,本

实验将从以下几个方面对分离纯化水生真菌的最佳条件进行初步研究。 1、采样后的最佳观察时间 2、单孢分离的最适方法 3、如何减少污染 4、如何提高单孢分离的萌发率 5、探索最适宜水生真菌生长的培养基 参考文献
[1] 杨光柱.水生丝孢菌的调查及部分属的系统学位置研究[D].云南大学,2012. [2] 余盼.中国腐生丝孢菌三个类群的分类研究[D].北京林业大学,2013. [3] 张仪东.中国南方部分地区枯枝暗色丝孢真菌分类研究[D].山东农业大学,2012. [4] 胡殿明.淡水粪壳纲及无性型真菌系统学及人为干扰下的淡水真菌多样性研究[D].中国林业研 究院,2011. [5] 金静.蚬河水域水生真菌的分离[D].山东省莱阳农学院,2004. [6] 胡殿明.中国水生真菌多样性[D].中国科学院微生物研究所,2012. [7]乌伊领湿地水生真菌多样性的研究[D].东北林业大学,2012.

三、实施方案、技术关键和预期目标成果 一、实施方案: 1、样品采集:在澜沧江采集直径约 1-5cm、长 20-30cm 的腐木 200 根,放在自 封袋内带回实验室。 2、样品培养:先将保鲜盒用 75%的酒精消毒,将以灭菌的卫生纸置于保鲜盒底 部并用无菌水喷湿,在其上放 2-3 根塑料吸管使样品不与吸水纸接触,将样品置于 吸管上,盖上盖子(保证其不完全密封,防止腐木发霉) ,并按需要喷洒无菌水,保 证样品不干燥。 3、培养基的配制: PDA 培养基:马铃薯 200g(去皮) ,葡萄糖 20g,琼脂 20g,蒸馏水(纯净水或 自来水)1000mL。 MEA 培养基:麦芽浸膏 30g,大豆蛋白胨 3g,琼脂 15g,蒸馏水 1000mL。 WA 培养基:琼脂 18g,蒸馏水 1000ml。 CMA 培养基:玉米粉 100g,琼脂 16g,蒸馏水 1000ml。 4、在相同的条件下,将同一个菌种分别转接到 PDA、MEA、WA、WPA 四种 培养基上,培养一段时间后观察纯培养物,测量其大小,并记录。 5、取 20 根木头,自样品培养之日起每隔 3 天观察一次,并记录观察到的菌种 数量。 6、在菌种相同和培养基相同的情况下,分别用以下两种方法做单孢分离:a、 在解剖镜下,用镊子或解剖针挑取真菌孢子,在无菌水中稀释后,平铺于 PDA 平板 上。b、在不碰到基质的情况下,用无菌牙签挑取真菌孢子,采用平板划线法,将真 菌孢子转接到培养基中。观察并对比两种方法的污染情况,记录实验结果。 二、技术关键: 1、无菌操作技术;解剖镜下单孢分离技术。 2、数据的分析及不同培养基的差异比较。 三、预期目标结果: 1、探索出分离纯化水生真菌的最佳条件 2、完成 1-2 篇论文

四、指导教师意见 对创新性、实用性、可行性等做出评价 水生丝孢类真菌(Hyphomycetes) 在自然界分布广泛,种类丰富、繁殖速度快, 与人类关系密切。在物质和能量循环系统中发挥着重要作用,无论是农业、工业、 医学和科学研究中都具有重要作用。本项目将对水生真菌分离纯化最佳条件的初步 探索研究,对以后研究水生真菌具有重要意义。实验方案及技术路线设计合理,该 同学及项目组成员对此项研究也有一定基础,微生物实验室能提供所需设备并保证 实验的顺利开展,能达到预期目标。 指导教师签字: 年 月 日 五、校属学院意见 学院是否同意推荐。

校属学院公章

校属学院院长签字: 年 月 日

六、评审结果








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