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共表达Asia1口蹄疫病毒P1-2A-3C基因和猪IL-18基因重组鸡痘病毒构建及表达


中 国 动 物 传 染病 学 报 2 1,96 : 03  0 1l ()3 —5 C iee o ma o Anma Ifciu  sae  hns  u l f i lnet s ess J     o Di ? 研 究论 文 ?   共表 达 As   i 1口蹄 疫病 毒 P -A-C 基 因和猪  a 12 3 I 1 L.8基 因重 组 鸡 痘 病 毒 构 建 及 表 达  鲁 会军 ,霍 晓伟  ,任静 强  ,常巧 呈 ,金扩 世  ,金 宁一     (. 事 医 学科 学 院 军事 兽 医 研 究所 吉林 省 人 兽共 患 病 预 防 与控 制 重点 实 验 室 ,长 春 1 0 6 ;2 吉林 大 学  1军 3 02 . 畜 牧 兽 医学 院 ,长 春 1 0 6 ;3 内蒙 古 民族 大 学 动 物科 技 学 院 ,通 辽 0 8 0 ) 302 . 2 00  摘  要 :为构 建 A il型 口蹄疫 重组鸡痘病毒 疫 苗,采集 口蹄 疫发病 牛的水 泡液及水 泡皮 ,用 R - C s a TP R法扩增 出 Asa1型 口 i    蹄 疫病 毒的前 体蛋 白基 因P —A 片段 和蛋 白酶基 因 3 12 C片段 ,分别 克隆至 p MDl. 8T载体上 ,通过酶切 连接 获得 质粒 p MD1 一 8  TP12 3 _ —A一C。再将 P -A一c 片段 与 p T — 8片段 连接起 来 ,构建鸡 痘病毒 中间转移质 粒 p AL P .A一c I 8 12 3 U AL I Ll UT . 12 3 —Ll 。通过  脂 质体 转染法 , p AL P —A一c I 8与 鸡痘病毒 2 2 4株 共感 染染鸡胚成 纤维细胞 (hc e   rof rbat C F , 将 UT . 12 3 . Ll 8E c i ne y  bo lss E ) 通  k mb i , 过 B d 三次加 压 筛选 , rU 筛选 出重组鸡 病毒株 v A . —A一C I 8 UT L P1 3 . 2 L1 。经 R -C TP R和 间接 免疫 荧光法鉴 定 , 明所 筛选的 1 证 株  重组鸡 痘病毒在 C F中能正确表达 P 一 一C基 因。 E J2 3 本研 究为研制安 全 、高效的亚洲 I型 F MD重 组鸡痘病毒 疫 苗奠定 了基础 。   关键词 :Asa1口蹄 疫病毒 ;鸡痘病毒 栽体 ;P -A 基 因;3 i   12 C基 因;儿一 基 因 ;表 达    中图分类 号 :¥ 5 .5 .:7 8 26 96Q   文献 标志码 :A  文章 编号 :1 7 .4 22 1 )60 3 —6 6 46 2 (0 10 .0 10   Co NSTR UCTI N  o AND  PRESS O N  EX I OF  RECo M BI NAN T  W LPo X  I Fo V UR S   Co NTAI NG  - A 一 C  ENE  NI P1 2 3 G oF  o T_ Fo AND . o UTH   S M DI EASE  I V RU S   TYPE AS A1AND  W I  L一 8GENE    I   S NE I 1   L  u- n, U   i . e ,, E  n —i g C A GQ a— eg   UH iu H OX a w i ’R N J gqa  , H N   i c n , j o  3 2 i n oh

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